Afinitní chromatografie

schéma kolony

Afinitní chromatografie umožňuje oddělit z komplexní směsi přinejmenším omezenou skupinu příbuzných proteinů, nebo i jen jeden určitý protein. Tato technika je založena na použití imobilizovaného ligandu reagující specificky s enzymem, který má být purifikován. Po přidání směsi proteinů k takovémuto ligandu se na něj vážou jen ty proteiny, které s ligandem tvoří silné vazby. Zbytek směsi protéká kolonou beze změny. Navázaný protein se následně euluje z imobilizovaného ligandu pomocí vysoce koncentrovaného roztoku solí nebo i roztokem s rozpustnou formou ligandu.

Tato metoda je velice účinná a dokonce překonává možnosti dosažitelné kombinací více klasických technik najednou.

Literatura

  • Pedro Cuatrecasas; Meir Wilchek. ENCYCLOPEDIA OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, FOUR-VOLUME SET, 1-4. Příprava vydání Lennarz,W.J., Lane, M.D.. [s.l.]: [s.n.] Kapitola Affinity Chromatography. 

Externí odkazy

Média použitá na této stránce

Chromatography column.PNG
Chromatography column with sample in three different stages