Alkalická fosfatáza

Alkalická fosfatáza

Alkalická fosfatáza (ALP, AP, EC 3.1.3.1) je enzym, který patří mezi hydrolázy. Odstraňuje fosfátovou skupinu na 5- a 3- pozici u mnoha typů molekul včetně nukleotidů, proteinů a alkaloidů. Proces odstranění fosfátové skupiny se nazývá defosforylace.

Někdy je GPI-vázaná na membránu.[1]

Vlastnosti

  • Alkalická fosfatáza je nejúčinnější v alkalickém prostředí
  • Alkalickou fosfatázu inhibuje (omezuje její působení) levamizol (anglicky: levamisole).[2]
  • Tento enzym nesnáší vysokou teplotu a proto se dá likvidovat varem

Alkalická fosfatáza u člověka

Alkalická fosfatáza se vyskytuje u člověka ve všech tkáních celého těla, ale je koncentrována zejména v játrech, žlučovodu, ledvině, kostech a v placentě.

Normální hodnoty alkalické fosfatázy v krvi člověka:)[3]

  • muži: 70-175 U/l (jednotek enzymové aktivity na litr)
  • ženy: 55-170 U/l

v krevní plazmě: 30-150 U/l

Využití

Alkalická fosfatáza má široké využití v molekulární biologii, protože DNA má fosfátovou skupinu umístěnou právě na 5´ uhlíku deoxyribózy. Odstranění fosfátové skupiny zabrání navázání 5' konce k 3' konci druhé molekuly.

Alkalická fosfatáza má také využití v imunochemii (imunohistochemii).

V molekulární biologii se pro alkalickou fosfatázu používají následující substráty:

  • pNPP = 4-nitrofenylfosfát
  • Fast Red, TR salt / NABP = 4-chloro-2-methylbenzen diazonium chlorid / naftol-AS-BI fosfát (anglicky: naphtol-AS-BI phosphate)
  • Fast Red, TR salt / NAMP = naftol-AS-MX fosfát
  • New Fuchsin / NABP
  • obecný fosfát / NBT, např. BCIP / NBT

Reference

  1. ↑ MURRAY, Robert K., Daryl K. Granner, Peter A. Mayes, Victor W. Rodwell. Harper's Illustrated Biochemistry. [s.l.]: Lange Medical Books/McGraw-Hill; Medical Publishing Division, 2003. ISBN 0-07-138901-6. 
  2. ↑ Alkaline phosphatase. I. Kinetics and inhibition by levamisole of purified isoenzymes from humans Archivováno 29. 4. 2005 na Wayback Machine. H Van Belle, Clinical Chemistry
  3. ↑ Biopsie kostní dřeně Archivováno 11. 3. 2016 na Wayback Machine. Medicentrum

Externí odkazy

Média použitá na této stránce