Ziehlovo–Neelsenovo barvení

Ziehlovo–Neelsenovo barvení je metoda v bakteriologii, jež se používá k průkazu tzv. acidorezistentní bakterií, konkrétně mykobakterií a nokardií a některých aktinomycet. Metodu objevili a popsali německý bakteriolog Franz Ziehl a patolog Friedrich Neelsen. Jedná se o jednu z nejpoužívanějších metod diagnostiky tuberkulózy.

Princip barvení

Metoda je založena na principu, že acidorezistentní bakterie mají schopnost přijímat zahřátá barviva (karbolfuchsin), která se udrží ve stěně i po následném odbarvení kyselým alkoholem.

Postup

1. Preparát fixovaný nad plamenem se přelije koncentrovaným karbolfuchsinem.
2. Zahřívá se, dokud není vidět stoupat pára (jinak by barvení karbolfuchsinem nebylo účinné).
3. Opláchne se vodou.
4. Preparát se odbarví kyselým alkoholem (1% HCl v 70% etanolu), dokud neodtéká z preparátu čirý alkohol.
5. Opláchne se vodou a dobarví se buď metylenovou modří nebo malachitovou zelení.

Acidorezistentní bakterie se jeví po výsledném barvení červeně (až růžově) na modrém (v případě met. modři) nebo zeleném pozadí (v případě mal. zeleně) (viz obrázek).

Literatura

• "Microbiology with Diseases by Body System", Robert W. Bauman, 2009, Pearson Education, Inc.
• SEBHATU, Mineab, KIFLOM, Bahlbi, SEYOUM, Melles et al. Determining the burden of tuberculosis in Eritrea: a new approach. Bull World Health Organ [online]. 2007, vol. 85, no. 8 [cited 2007-11-08], pp. 593-599. Available from: [1]. ISSN 0042-9686.
• LANIADO-LABORIN, Rafael and CABRALES-VARGAS, Noemí. A positive sputum smear test is not always indicative of pulmonary TB: Another reason to order routine cultures. Rev. Inst. Nal. Enf. Resp. Mex. [online]. 2005, vol. 18, no. 4 [cited 2007-11-08], pp. 286-289. Available from: [2]. ISSN 0187-7585.

Externí odkazy

• Obrázky, zvuky či videa k tématu Ziehl-Neelsenovo barvení na Wikimedia Commons